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生长因子试剂盒注意事项和ELISA技术指南

2016-09-26 浏览次数:146

  生长因子试剂盒实验室注意事项:
    1、试剂不能与手接触。
    2、要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,绝对不准用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净、擦干后,方可取用另一种试剂。
    3、试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后将瓶放回原处。
    4、已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内。

   常见的ELISA常见技术指南:
    1、选择抗体时zui好选择一个单抗和一个多抗进行配对;若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体;zui好从同一家公司选择抗体对。
    2、ELISA实验中为了确定zui佳信号和zui低背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时,应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
    3、标准品的配制:对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节。在使用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。
    4、一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml 到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
    5、为了优化灵敏度,建议过夜孵育标准品和标本。
    6、若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
    7、当测定混合液体中的抗原时,如血清大鼠同型半胱氨酸,建议在标本稀释液中加不相干的Ig。

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